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本文来源:募格课堂、科学网、科研大匠

2022年1月21日, 河北科技大学韩春雨团队Nucleic Acids Research(IF=17)在线发表题为 “A Cas6-based RNA tracking platform functioning in a fluorescence-activation mode ” 的研究论文。在这篇新论文中,韩春雨及其研究团队开发出了一种全新的具有高灵敏度特异性的基于Cas6的RNA荧光追踪平台

这距离他当时引起巨大关注和争议的NgAgo研究论文已经过去了快6年时间。

文章发表后,,韩春雨在专访中表示, “最新发表的这项研究和NgAgo没有关联,但也是新技术开发,或者说工具的研究发明。” 他表示,“过去六年,我们一直在做工具的开发,Ago相关的工具我们也一直在做。”

对于新研究,韩春雨表示:“我们是有信心的”“重复性是不成问题的。”

采访中,《中国科学报》问到“当年如何得到“没有主观造假”的调查结果”,韩春雨表示“不再解释”,他说,“学校考虑到涉及学术,放在公众面前可能反而会引起一些误解,让我不要再去说了。”

值得一提的是,这篇最新论文与被撤稿的NgAgo研究论文的第一作者是同一人,都是高峰(Feng Gao)

韩春雨 图源:网络

第一作者:高峰

2016年5月,韩春雨作为通讯作者在国际顶级学术期刊Nature Biotechnology杂志发表了题为: DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute (使用NgAgo进行DNA引导的基因组编辑)的研究论文。研究发现NgAgo对真核生物(包括人)具有基因编辑能力,发明一种全新的基因编辑技术NgAgo-gDNA。被媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的故事原型炒作而走红。

该论文原本浙江大学教授沈啸为共同通讯作者,但在后续修改版本中,沈啸从作者名单中去除了。

此后半年,韩春雨个人及其所在大学陆续获得各类名誉和大量经费资助,随后被媒体热捧,称其为“三无”教授但有“诺奖级”发现

基因组编辑技术动画演示

2016年5月20日,原清华大学著名结构生物学教授颜宁在微博上首先提出论文结果可重复性的问题。

图源:央视新闻

8月左右,数名国外学者称多次实验后,仍未能做出结果。并建议《自然-生物技术》介入,要求韩春雨公开原始数据。韩春雨曾回应,质疑不科学,并称已有实验室重复成功。

澳大利亚国立大学研究者Gaetan Burgio于2016年7月29日在Twitter上的发言,图片来自Twitter截图

一年后(2017年8月),《自然—生物技术》发表题为《是该数据说话的时候了》社论,宣布撤回韩春雨团队于2016年5月2日发表在该期刊的论文。

2018年9月,河北科技大学发布公告,韩春雨团队不存在主观造假。但依据有关规定,取消韩春雨所获得的荣誉称号,终止韩春雨团队承担的科研项目并收回科研经费。

韩春雨团队回应称,实验设计存在缺陷、研究过程存在着不严谨的问题。

当时,科学界的主要质疑问题之一是“NgAgo”是否能编辑基因组。对于大多数实验室无法重复的原因,韩春雨强调,“科学是有条件的可重复,使用的生物材料其实是很重要的”。他认为,“有可能是因为大规模的,大范围的细胞污染”。这个观点也是自“质疑”开始之后他所一直坚持的。

图源:央视新闻

面对这起事件,众多科学家也表示,韩春雨的事情一定需要在学术范围内有一个明确的结果。也有科学家认为,如果韩春雨这件事情本身没有涉及到数据造假,从科学本身,它是需要耐心和时间的。

2021年9月3日,普渡大学Kevin V Solomon团队在Nucleic Acids Research(IF=16.97) 在线发表题为“NgAgo possesses guided DNA nicking activity ”的研究论文,再次发掘出 NgAgo 在基因编辑方面的潜力,并为看似矛盾的报告提供了新的见解。

该研究发现NgAgo 是一种新型 DNA 核酸内切酶,这种切割介导原核生物中的基因编辑作用。该研究工作建立了探索 NgAgo 活性(以及其他 pAgo 的活性)的创新方法,并确定了将其发展为下一代合成生物学工具的关键蛋白质特征。

2021年7月23日,华中科技大学罗迪贤及南华大学胡政共同通讯在Molecular Biotechnology 在线发表题为“Identification of a Novel Cleavage Site and Confirmation of the Effectiveness of NgAgo Gene Editing on RNA Targets”的研究论文,该研究证实NgAgo在体外和体内可以进行RNA编辑。

不过,其他团队有另外的发现:

南通大学刘东团队在Cell Research 发表题为“NgAgo-based fabp11a gene knockdown causes eye developmental defects in zebrafish” 的研究论文,该研究发现gDNA / NgAgo可以与靶基因结合以阻断其转录,同时该研究也没有发现NgAgo具有基因编辑的能力。

该研究重新表征NgAgo在原核生物中的功能。NgAgo 在非嗜盐宿主中表达不佳,即使在重折叠后,大多数蛋白质仍不溶且无活性。然而,该研究发现可溶性部分确实起到了切割 DNA 核酸内切酶的作用。

总的来说,该研究结果证明了 NgAgo 在基因编辑方面的潜力,并为看似矛盾的报告提供了新的见解。

《中国科学报》曾报道:“这波之后,NgAgo这个研究方向在中国做得很慢。韩春雨他们的工作开展起来也比较困难,连学生也没有新招。”

参考消息:

https://doi.org/10.1093/nar/gkac014

https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs12033-021-00372

https://academic.oup.com/nar/advance-article/doi/10.1093/nar/gkab757/6363767

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